-
酶底物原理檢測大腸菌群、糞大腸菌群，大腸埃希氏簡介
發布時間： 2024-04-30 點擊次數： 2675次●GB 4789.28《 食品安全國家標準食品微生物學檢驗培養基和試劑質量控制》要求驗證每一批培養基，確保所接收的每批培養基滿足質量要求；
●EPA《飲用水檢測實驗室認證手冊》第五版(2005年1月)中對質量控制的要求：每一批培養基以及實驗室自制的培養基在使用前都應該采用陽性和陰性菌株進行無菌性檢驗。
產品特點
適用性廣/可靠度高
參照GB/T 5750-2023《生活飲用水標準檢驗方法》和 HJ1001-2018《 水質總大腸菌群、糞大腸菌群和大腸埃希氏菌的測定酶底物法》中酶底物法檢測培養基的要求，環凱生物自主研發了酶底物法專用的MMO-MUG培養基，通過100株包含大腸菌群、大腸埃希氏菌或糞(耐熱)大腸菌群(包括從水樣分離的菌株和標準菌株)的驗證，結果顯示培養基特異性高，陽性菌株特征明顯，無假陰性情況。靈敏度高，可精確檢出低至 1MPN/100mL 水樣中大腸菌群和大腸埃希氏菌或糞(耐熱)大腸菌群活菌，而對水樣中常見包括酶底物假陽性菌株在內的非大 腸菌群抑制明顯。產品通過了生活飲用水、地表水、地下水、生活污水和工業廢水在內超200份樣品的測試。
為了滿足客戶的方法驗證、培養基適用性驗證、陽性對照和 定量檢測等需求，環凱生物推出可溯源的質控樣。產品結果顯示底物或熒光底物特異性高，通過抑菌劑抑制其他異養菌，可準確檢測出水樣中大腸菌群和大腸埃希氏菌或糞(耐熱)大腸菌群活菌。通過顏色或熒光判讀結果，陰陽性區分明顯。
操作簡單/檢驗周期短
只需4步即可完成檢測，平均每分鐘可檢測一份樣品。
檢驗周期只需24小時，無需驗證試驗。
檢測原理
總大腸菌群、糞大腸菌群、大腸埃希氏菌能產生β-半乳糖苷酶，使培養基中的無色底物鄰硝基苯β-D-吡喃半乳甘糖分解黃色的鄰硝基苯酚，其中大腸埃希氏菌還能同時產生β-葡萄糖醛酸酶，使培養基中的4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖醛酸酶 分解為-甲基傘形酮，在紫外燈照射下產生熒光。在36±1℃經 培養后培養孔變黃的為總大腸菌群；培養孔變黃并伴有熒光的為大腸埃希氏菌；44.5℃培養后培養孔變黃的為糞大腸菌群，變黃并有熒光的為大腸埃希氏菌。統計陽性反應出現的數量，對照MPN圖表，分別計算出總大腸菌群，糞大腸菌群，大腸埃希氏菌的濃度值。
——水中大腸菌群檢測酶底物法產品系列(含質控包)技術參數
產品
貨號
技術參數
Minimal medium
ONPG-MUG
培養基
DW001
●100袋/盒
●封裝包裝
●輻照滅菌
97孔定量盤
DW-DLP-97
●環氧乙烷滅菌
●97孔定量盤無需稀釋可檢測≤2419
MPN/100mL總大腸菌群和大腸埃希氏菌或糞大腸菌群
51孔定量盤
DW-DLP-51
●環氧乙烷滅菌
●51孔定量盤無需稀釋可檢測≤200
MPN/100mL總大腸菌群和大腸埃希氏菌或糞大腸菌群
97孔標準陽性比色盤
DW-YXP-97
●裝有黃色及熒光比色物，用于輔助判讀陽性結果
●環氧乙烷滅菌
51孔標準陽性比色盤
DW-YXP-51
●裝有黃色及熒光比色物，用于輔助判讀陽性結果
●環氧乙烷滅菌
取樣瓶
DW-QYP-10
●20瓶/盒,5盒一箱
●每瓶含10mg 硫代*
●輻照滅菌
水質酶底物法
檢測質控樣品
QSM006
可溯源的質控樣
●含大腸埃希氏菌，肺炎克雷伯氏菌，銅綠假單胞菌
酶底物定量盤程控封口機Elte Sealer-1
778860728
●尺寸420mm長x320 mm寬x360mm 高
●重量約12kg
●封口速度12秒每片
● 預熱時間<4min
● 通過ISO 認證
●帶計數功能的程控系統
●能連續封口定量盤，不間斷，提供工作效率
●硅膠托根據環凱生物定量盤設計，使定量盤封口平整
● 噪音<48dB(A)
● 外罩溫度<40℃
●工作電壓AC110V~ 220V
●工作環境溫度-10℃~ 50℃
酶底物定量盤暗箱式三用紫外分析儀
UV Analyzer-1
778860729
●光源打開方式：手動按鈕
●光源：長壽命LED 光源、365nm 和254nm 波長紫外燈
●材質：金屬
●外形尺寸：320×320×260 mm
● 電源：AC220V
●重量：3kg
●工作電壓AC110V~
220V
●工作環境溫度
10℃~50℃
——適用于自來水系統、疾病預防控制中心、進出口檢驗檢疫 系統、第三方檢測實驗室
符合GB/T5750-2023《生活飲用水標準檢驗方法》酶底物法(MMO-MUG)培養基
步驟1-混合
將MMO-MUG培養基加入到 100mL 水樣中，混合均勻。
步驟2-定量
倒入97孔定量盤，無需稀釋定量范圍：1-200MPN/100 mL 總大腸菌群和大腸埃希氏菌。
步驟3-封口培養
在程控定量封口機上封口后，36±1℃培養24小時。
步驟4-結果讀取
無色：陰性；
僅變黃：總大腸菌群陽性；
變黃且發熒光：大腸埃希氏菌陽性；對照MPN 表計數定量。
質量控制體系（質控樣）
請在專業技術人員指導下完成
意義
● 符合GB27043-2012 合格評定能力驗證的通用要求，符合CNAS-CL01-A001-2022 對微生物實驗室的要求；
● 用于識別培養基、設備、方法是否準確及評估操作人員的能力和確認其資格；
● 檢測測量方法的有效性。
操作步驟
準備1個空的無菌瓶(>300 mL) 和300mL 稀釋液(無菌水或無菌PBS 緩沖液)。
將質控樣凍干粉從冰箱中取出，置于室溫10~15分鐘平衡溫度。
打開質控凍干粉，加入稀釋液3mL溶解凍干粉，待充分溶解后全部轉移到無菌瓶中。
加少量的稀釋液沖洗凍干粉瓶，回收所有質控樣菌懸液到無菌瓶中，將剩余的稀釋液倒入，充分振蕩確保均勻，總體積為300mL。
每個質控樣凍干粉的量可做3個平行實驗，將質控樣懸液倒入取樣瓶，每瓶定容到100mL 刻度。
將MMO-MUG 培養基倒入每個含質控樣取樣瓶中，混勻。將所有混合液倒入97孔定量盤中并封膜，在36士1C培養24小時。
判讀：黃色孔格為總大腸菌群陽性，黃色且顯熒光為大腸埃希氏菌陽性，對照MPN表定量計數。
酶底物法檢測配置單一飲用水檢測
產品
貨號
技術參數
Minimal medium
ONPG-MUG培養基
DW001
100袋/盒
97孔定量盤
DW-DLP-97
用于檢測≤2419MPN/100ML
總大腸菌群和大腸埃希氏菌
或糞大腸菌群
51孔定量盤
DW-DLP-51
用于檢測≤200MPN/100ML總大腸菌群和大腸埃希氏菌或糞大腸菌群
97孔定量盤
DW-YXP-97
用于輔助判讀陽性結果
51孔定量盤
DW-YXP-51
用于輔助判讀陽性結果
水質酶底物法
檢測質控樣品
QSM006
用于質酶底物法檢測質控
酶底物定量盤程控封口機
Elte Sealer-1
778860728
配合定量盤使用，
用于定量檢測大腸菌群
酶底物定量盤暗箱式三用 紫外分析儀UVAnaly zer-1
778860729
用于避免紫外線輻射
- 下一篇：支原體培養基簡解
- 上一篇：GB4789.3-2016 大腸菌群計數及注意事項
銷售熱線
主營產品：不銹鋼過濾系統，紅外線接種環滅菌器，浮游菌采樣器，脈沖震蕩樣品前處理器，數字化智能電熱鼓風干燥箱，數字化智能電熱恒溫培養箱，實驗室設備及環境溫濕度監測系統，潔凈工作臺等實驗設儀器設備。
