產(chǎn)品名稱：一體式第一鏈cDNA超級預(yù)混液（去除gDNA）
英文名稱：Plus All-in-one 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix (gDNA Purge)

產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格：

產(chǎn)品描述：第一鏈cDNA合成預(yù)混液是以mRNA或者總RNA為模板，高效 合成第一鏈cDNA。本產(chǎn)品含有反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)所需的全部試劑 （II Reverse Transcriptase，RNase Inhibitor，Oligo(dT)18，Random N6，dNTPs）。反應(yīng)時只需要加入RNA模板和水即可，操作簡單，降 低操作過程中的污染。本制品含有去基因組成分gDNA Purge，以 RNA為模板進(jìn)行cDNA第一鏈合成時，可以同步去除基因組DNA污 染，反應(yīng)結(jié)束后，75℃加熱5分鐘，就可以失活反轉(zhuǎn)錄酶，RNA酶 抑制劑。合成的第一鏈cDNA能直接用于PCR 或熒光定量PCR的模 板，第二鏈cDNA的合成或線性RNA擴(kuò)增，也可用于需要用帶有 放射性或非放射性核苷酸標(biāo)記第一鏈cDNA的實驗。

產(chǎn)品特點：
      本制品采用耐高溫逆轉(zhuǎn)錄酶，大幅提高熱穩(wěn)定性和 cDNA 合 成效率； 
      本制品中添加的II Reverse Transcriptase 無 RNase H 活性，可 避免第一鏈 cDNA 合成過程中，RNA/DNA 雜交模板鏈中 RNA 降解，保證 cDNA 合成的質(zhì)量；
      本制品中 Random N6 和 Oligo(dT)18 引物比例經(jīng)過優(yōu)化，可均 勻合成樣品中的 cDNA；
      本制品中含有去基因組成分，反轉(zhuǎn)錄時可同步去除基因組 DNA 污染。

保存溫度：-20℃。

產(chǎn)品包裝：

注意事項：
      1）用DEPC 處理實驗用到的所有實驗器材，或者 購買已經(jīng)證明無核酸酶的實驗用具，實驗過程戴 手套并經(jīng)常更換手套，避免 RNA 酶的污染。 
      2）確保所用試劑中無 RNA 酶污染。 
      3） 試劑盒要嚴(yán)格密封保存。在反轉(zhuǎn)錄過程中，所 有管子要確保扣嚴(yán)。 
      4） 純化過的RNA 必須保證不含有鹽，金屬離子， 乙醇和本酚，以上成分會干擾第一鏈 cDNA 的合 成反應(yīng)。可采用乙醇沉淀RNA 的方法去除掉痕量 污染物。 
      5） 為保證反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的有效進(jìn)行，需使用高質(zhì)量 的RNA 模板。 
      6） 實驗結(jié)果顯示，最快逆轉(zhuǎn)錄速度可達(dá)2kb/min， 需要提高反轉(zhuǎn)錄效率或模板含量較低時可以適當(dāng) 延長反轉(zhuǎn)錄時間。

操作方法與常用PCR 循環(huán)：

注意：當(dāng) RNA 濃度較高或目標(biāo)基因?qū)俑呖截惢驎r，可將去基因組 和逆轉(zhuǎn)錄合為一步操作，更省時省力。所有組分加到一起，50℃孵 育15-30min，最后75℃孵育5min 終止反應(yīng)即可。

客戶應(yīng)用實例與本試劑盒在 37℃條件下保存的穩(wěn)定性驗證：